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      mIHC試劑盒上架 | 多重免疫組化染色TSA技術

      2022-08-11
      瀏覽次數: 2893

      實驗原理:

      酪酰胺信號放大技術(Tyramide Signal Amplification, TSA)主要是利用酪胺的過氧化物酶反應。酪胺非活性熒光素底物在HRP和過氧化氫的作用下,會被激活產生活化熒光底物,同時形成共價鍵結合位點,共價結合在蛋白抗原表面或附近的酪氨酸殘基上,抗原和抗體的結合部位就會有大量的酪胺熒光素沉積,使抗原位點處的熒光信號增強。

      酪胺熒光素底物-抗原酪氨酸共價穩定結合,故TSA信號不會受微波影響,可用熱修復法清除第一輪與抗原非共價結合的抗體復合物,并能在抗體去除后保留與抗原相關的熒光信號。然后,再用第二種一抗進行第二輪孵育,同時更換另一種酪胺熒光素底物,多次循環反復,不同的酪胺熒光素進行標記就可實現多重免疫組化染色。

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      TSA原理示意圖

      實驗方法:

      實驗前準備:

      1、PBS緩沖液、枸櫞酸鈉抗原修復液(或其他修復液)及3%?H2O2溶液;

      2、用于IHC-P的多個靶標一抗;

      3、mIHC試劑盒(多聚HRP二抗、TSA熒光素、TSA增強劑)


      操作步驟:

      石蠟切片脫蠟至水抗原熱修復阻斷內源性過氧化物酶血清封閉

      第一個一抗孵育對應HRP二抗孵育添加TSA染色工作液1→微波加熱處理

      第二個一抗孵育對應HRP抗孵育添加TSA染色工作液2微波加熱處理

      第三個一抗孵育對應HRP二抗孵育添加TSA染色工作液3→微波加熱處理

      ……

      以此循環N細胞核復染DAPI→封片及檢測

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      多重免疫組化原理示意圖

      TSA技術優勢:

      1.?提高信號放大倍數,顯著擴增抗原相關熒光信號;

      2.?可檢測低蛋白豐度的靶標,提高實驗體系靈敏度;

      3.?可微波去除一抗/二抗及非特異性染色;

      4.?降低一抗使用量,節約一抗成本;

      5.?針對每張組織切片可收集到更多的數據,實現一張切片多達6種靶標的共表達;

      6.?適合任何經IHC-P驗證的抗體,同一樣本中的靶標都可以選用高特異性的正能生物病理級抗體;

      mIHC試劑盒上架 | 多重免疫組化染色TSA技術

      7.?可在同一樣本中使用同一種屬來源的多種一抗進行多標記識別,例如都選用兔單克隆抗體,避免了交叉干擾,同時解決了一抗二抗種屬匹配限制問題。


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      產品信息:

      我司開發的多重免疫組化試劑盒,具體TSA熒光染料參考如下:TSA-480,TSA-520,TSA-570,TSA-620,TSA-670,TSA-690,TSA-780。

      試劑盒中的熒光染料可單獨或配合使用,可以實現雙標、三標以及更多重熒光放大/多重同源抗體熒光標記等功能,極大滿足淋巴細胞檢測、腫瘤微環境等各領域實驗需求。


      • 產品貨號:18002

      • 產品名稱:Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Double)

      • 產品規格:50T/100T

      • 結果展示:Immunohistochemistry analysis of paraffin-embedded chimera mouse carcinoma using F4/80 (Green) and CD206 (Red) antibodies.

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      • 產品貨號:18003

      • 產品名稱:Goat Anti-Mouse/Rabbit Multiplex IHC Detection Kit (Triple)

      • 產品規格:50T/100T

      • 結果展示:Immunohistochemistry analysis of paraffin-embedded mouse hippocampus tumor using DCX (Green), GFAP (Red) and NeuN (Pink) antibodies.

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