ExactBlot? Secondary Antibody for IP

沒'輕'?沒'重'，安然無憂！

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IP（免疫沉淀）實驗是一種常用的生物化學實驗技術，用于檢測和分離特定的蛋白質。它基于抗體的高度特異性，可以用來富集某個特定的蛋白質，并去除其他非特異性的蛋白質。
免疫沉淀的簡要步驟為：1）將抗體與固相支持物相互作用。2）抗體與待測樣品中的目標蛋白質結合，形成抗原-抗體復合物。3）通過洗滌步驟去除非特異性的蛋白質。4）將特異性蛋白質從固相支持物上解離下來，完成富集。5）通過多種方法對富集后的蛋白質進行分析。
免疫沉淀實驗是研究蛋白質相互作用、信號傳導以及調控蛋白功能的重要工具之一，廣泛應用于生物醫學研究中。

IP實驗原理

IP中的輕重鏈干擾

當進行IP實驗時，IP抗體在洗脫后加入loading buffer的變性過程中被破壞了結構，斷裂為組成抗體的輕重鏈。此時若IP抗體種屬與WB抗體種屬來源相同，變性后的抗體就會被常規Anti-IgG(H+L)二抗識別，顯影時就出現了IP抗體變性后產生的輕重鏈。其中輕鏈大小為25kDa左右，重鏈大小為55kDa左右，當目標蛋白分子大小在輕重鏈附近時，這類信號可能會影響我們對實驗結果的判斷。

避免輕重鏈雜信號的常見方法有：
1）捕獲抗體、檢測抗體采用不同來源物種，使用針對檢測抗體物種的特異性二抗；
2）捕獲抗體采用沒有恒定區的納米抗體。
但是受限于實驗經費和各種外部因素，這兩種方法有時并不是這么容易實現。

正能ExactBlot? IP專用二抗

為了幫助客戶避免在免疫沉淀實驗中出現的輕重鏈干擾問題，正能生物開發了專用于IP實驗的優化二抗，優化后的二抗具有空間特異性，能夠識別空間構象表位，只與非變性的WB檢測一抗相互結合，而不與變性后失去原本空間表位的捕獲一抗結合，因此既不識別抗體重鏈也不識別輕鏈，輕松避免了實驗干擾。

圖左：使用常規Anti-IgG(H+L)，檢測時變性后的抗體輕重鏈均被識別。

圖右：使用正能- ExactBlot? IP專用二抗，有效避免輕重鏈干擾，目的蛋白信號更加清晰。

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ExactBlot? Anti-Rabbit IgG for IP (HRP)

Cat No. 550124

Application: WB,ELISA

Host: Mouse

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ExactBlot? Anti-Mouse lgG for IP(HRP)

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